Ziraat Türkiye Kupası play-off aşamasında, 2. kademe maçları sonucu tur atlayan 18 takım, 2009-2010 sezonunda Süper Lig’i 5-15 arasında tamamlayan 11 takım ve Süper Lig’e yükselen 3 takım tek maçlı eliminasyon sistemine göre mücadele edecek.

Süper Lig’i geçen sezon ilk 3 sırada tamamlayan Bursaspor, Fenerbahçe ve Galatasaray ile son kupa şampiyonu Trabzonspor, direkt grup aşamasında katılacak.

Tek maçlı eleminasyon sistemine göre 26, 27 veya 28 Ekimde oynanacak play-off turunda eşleşmeler şu şekilde oluştu:

         Eskişehirspor-Denizlispor
         Ankaragücü-Tokatspor
         Konyaspor-Bucaspor
         Sivasspor-Manisaspor
         Karşıyaka-Kayserispor
         Kayseri Erciyesspor-Konya Torku Şekerspor
         Gaziantepspor-Türk Telekomspor
         Beypazarı Şekerspor-Kardemir Karabükspor
         Gençlerbirliği-Akçaabat Sebatspor
         Beşiktaş-Mersin İdmanyurdu
         İstanbul Büyükşehir Belediyespor-Dardanelspor
         Orduspor-Medical Park Antalyaspor
         Menemen Belediyespor-Kasımpaşa
         Yeni Malatyaspor-Hacettepe
         Gaziantep Büyükşehir Belediyespor-Samsunspor
         Kırıkhanspor-Bandırmaspor 30 EYLÜL 2010